Q：
为何不同实验室使用相同细胞因子组合培养T细胞，仍可能出现分化结果差异？
A：
T细胞来源是否一致，细胞密度、使用培养基的差异，如果是含血清培养基，胎牛血清是细胞培养中最大的变量来源之一。不同批次、不同来源的FBS在成分（生长因子、激素、细胞因子、脂类等）上差异巨大，会显著影响T细胞的活化、增殖和分化。细胞因子添加时间和方式： 是在活化开始时同时加入，还是在活化后某个时间点加入？是分批添加还是一次性添加？这会影响细胞因子在关键时间点的有效浓度。建议：标准化操作流程（SOP）并采用化学成分明确培养基。
Q：
在CAR-T细胞生产工艺中，为何IL-7和IL-15逐渐替代IL-2作为核心扩增因子？
A：
首先是IL-2的固有缺陷——虽然它能强力扩增T细胞，但会促进效应T细胞分化导致终末耗竭，同时扩增Treg细胞这个“叛徒”会抑制抗肿瘤活性。IL-7/IL-15这对组合的优越性很有意思：IL-7维持T细胞基本生存，而IL-15促进干细胞样记忆亚群增殖。更妙的是它们能避免Treg扩增，IL-15甚至能削弱Treg功能。
Q：
细胞因子在临床转化中面临“半衰期短”和“系统毒性”两大瓶颈，有何创新解决方案？
A：
延长半衰期，①Fc融合蛋白：延长循环时间；②PEG化修饰：增加分子量，减少肾清除（如PEG-IFNα）——可能降低生物活性，且PEG可能引发免疫原性。③脂质体/聚合物纳米粒：包裹IL-12、TNF-α等，延缓释放并保护其不被酶解。
降低系统毒性，①靶向递送策略：抗体-细胞因子融合（Immunocytokine）：如抗EGFR-IL-12靶向肿瘤（局部富集于肿瘤，降低脱靶毒性）②中和抗体备用系统：预先注射IL-6R抗体（托珠单抗）或TNF-α拮抗剂，降低细胞因子风暴（CRS）。
